Kako funkcioniše sistem za snimanje živih ćelija?

U snimanju živih ćelija, žive ćelije se posmatraju tokom određenog vremenskog perioda pod mikroskopom za snimanje živih ćelija. Kako bi se omogućili automatizirani radni tokovi snimanja živih ćelija, današnja rješenja za snimanje živih ćelija uglavnom se sastoje od potpuno motoriziranog istraživačkog mikroskopa, uključujući digitalnu mikroskopsku kameru i namjensko softversko rješenje za dizajniranje i izvođenje eksperimenta, kao i za analizu podataka. Slike jednog vidnog polja ili čak cijele površine uzorka snimaju se uzastopno nakon određenih vremenskih tačaka tokom dužeg vremenskog perioda. Da bi se ćelije održale u fiziološkim uslovima tokom eksperimenta, sistemi za snimanje živih ćelija obično su opremljeni inkubacionim komorama za preciznu kontrolu temperature, vlažnosti i koncentracije CO2. Bitno je da se ovi parametri mogu prilagoditi potrebama ćelija i da se mogu održavati na konstantnom nivou tokom čitavog perioda eksperimenta.

Ćelije se mogu snimiti različitim načinima snimanja, kao što je mikroskopija svijetlog polja, podržana na primjer metodama faznog kontrasta. Osim toga, nekoliko tehnika snimanja živih ćelija je evoluiralo korištenjem specifičnih fluorescentnih boja za snimanje živih ćelija kako bi se mogle identificirati ćelije od interesa i također selektivno pratiti razvoj, diferencijaciju ili održivost stanica. Dakle, fluorescentna mikroskopija živih ćelija je koristan alat koji može vizualizirati mnogo dodatnih informacija o pojedinačnim stanicama. Mikroskopija super rezolucije živih ćelija ili 3D snimanje živih ćelija pružaju dodatnu dubinu i uvid u analizu živih ćelija.

Snimljene slike se mogu otvoriti, pregledati i analizirati pomoću namjenskih softverskih paketa za analizu živih ćelija. Serija pojedinačnih slika može se pretvoriti u video snimke ćelija uživo, a softverski algoritmi pružaju detaljne analize ćelija tokom vremena, kao što su putanje migrirajućih ćelija. Vrijeme stoga nije samo još jedna dimenzija u slikanju živih ćelija, već omogućava opažanje procesa koje inače ne bismo mogli osjetiti.